¿Por qué usar calor para teñir las endosporas? / Ciencias

Por que usar calor para tenir las endosporas Ciencias

Se usó el procedimiento de tinción diferencial para la tinción de endosporas. El verde de malaquita es el tinte principal para teñir las células vegetativas y las endosporas de las muestras. Luego se usa calor para ayudar a penetrar la mancha primaria en las endosporas. Después del blanqueo, el fondo se coloreó con azafrán contrateñido.

Dos géneros patógenos conocidos como Bacillus y Clostridium producen endosporas metabólicamente inactivas para soportar condiciones ambientales adversas. Debido a que las endosporas causan muchas enfermedades mortales, su identificación es muy importante en las muestras clínicas.

Áreas clave cubiertas

1. ¿Qué son las endosporas?
- Definición, Hechos
2. ¿Qué es la tinción de endosporas?
- Técnica de tinción de endosporas
3. ¿Por qué usar calor para teñir las endosporas?
- uso de calor

Palabras clave: endosporas, calor, verde malaquita, poros, células vegetativas

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¿Qué son las endosporas?

Las endosporas son estructuras duras producidas por ciertos géneros de bacterias patógenas, como Bacillus y Clostridium, para sobrevivir en condiciones ambientales adversas. Estas condiciones adversas pueden ser calor, sequedad, radiación o productos químicos. El proceso de producción de endosporas a partir de células vegetativas se denomina esporulación. Este proceso puede tomar de 8 a 10 horas. Las endosporas pueden existir dentro de las células bacterianas o como esporas libres. La formación de endosporas se muestra en la Figura 1.

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Figura 1: Formación de endosporas

Las endosporas son metabólicamente inactivas o latentes. Contienen una pequeña cantidad de citoplasma y ADN cubiertos con una capa exterior protectora. La pared celular está compuesta de ácido dipicolínico, que imparte propiedades termoestables a las endosporas. Cuando las condiciones ambientales se vuelven favorables, las endosporas germinan para producir nuevos organismos. El tratamiento térmico de humedad a 121°C durante 15 minutos destruye las endosporas bacterianas.

¿Qué es la tinción de endosporas?

La tinción de endosporas es un proceso de tinción diferencial en el que diferentes estructuras de la muestra se tiñen con diferentes colores. Permite la identificación de endosporas a partir de células vegetativas. El método estándar para la tinción de endosporas es la técnica de Schaeffer-Dulton. El tinte principal para esta técnica es el verde malaquita y el respaldo es el azafrán.

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Técnica de Schaeffer-Dulton - Procedimiento

1. Después de sembrar en portaobjetos de microscopio, sature las muestras bacterianas con una solución de verde de malaquita.
2. Luego caliente suavemente el portaobjetos durante 3-5 minutos hasta que el tinte comience a evaporarse.
3. Enfríe la cuchilla y lávela con agua para decolorarla.
4. Finalmente, después de la contratinción, enjuague los portaobjetos.
5. Seque al aire los portaobjetos y observe bajo el microscopio.

Aquí, las endosporas se tiñen de verde con verde malaquita, mientras que las células vegetativas se tiñen de rosa con safranina. Las endosporas teñidas por la técnica de Schaeffer-Dulton se muestran en la Figura 2.

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Figura 2: Endosporas (verde) y células vegetativas (rosa)

Otra técnica de tinción para endosporas puede identificarse como el método de Doner. En este método, las endosporas se teñirán de rojo.

¿Por qué usar calor para teñir las endosporas?

La capa córnea de la endospora resiste la tinción. Por lo tanto, la mancha primaria debe introducirse en la endospora. El uso de calor está destinado a aumentar la penetración de la mancha primaria en las endosporas. Las cuchillas con verde malaquita se pueden calentar hasta 3-5 minutos. El tiempo de calentamiento es proporcional a la cantidad de colorante que penetra en la pared de la endospora. Los tiempos de calentamiento más prolongados crean poros en las paredes de las endosporas, lo que permite que penetre más colorante con mayor facilidad.

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En conclusión

Las endosporas son las células germinales de la mayoría de las bacterias patógenas. Por lo tanto, la identificación de endosporas en las muestras es fundamental para el diagnóstico.

Referirse a:

1. "Tinción de endosporas: comprensión de definiciones, técnicas y procedimientos". MicroscopeMaster, disponible aquí.

Imagen proporcionada por:

1. "Endosporación" Por Farah, Sophia, Alex - Trabajo propio (CC BY-SA 4.0) a través de Commons Wikimedia
2. "Esporas de Bacillus subtilis" Por Y tambe (cargador original) - Trabajo propio (CC BY-SA 3.0) a través de Commons Wikimedia

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